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細胞凍存液的保存條件是什么?

更新時間:2023-05-11   點擊次數(shù):2622次
  細胞凍存是一種常見的細胞保存方法,涉及將細胞在低溫下冷凍保存以延長其壽命。
 
  細胞凍存液的保存條件如下:
 
  1、凍存液的配制
 
  配制通常包括三種核心成分:凝血酸鈉、DMSO和細胞培養(yǎng)基。其中凝血酸鈉的濃度應為2.5g/L,DMSO的濃度應為10%(/v),而細胞培養(yǎng)基的組成則根據需要進行調整。
 
  2、細胞的收集和處理
 
  在進行細胞凍存之前,需要確保細胞處于最佳狀態(tài)。這通常包括在合適的生長條件下培養(yǎng)細胞,并確保它們處于對數(shù)生長期。在凍存之前,需要用無菌PBS或胰酶等化學物質將細胞從培養(yǎng)瓶中剝離并洗滌。
 

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  3、凍存管的選擇
 
  選擇合適的凍存管也很重要。一般來說,推薦使用聚丙烯酸(PP)管,因為它們具有較高的耐凍性,并且不會導致細胞損傷。
 
  4、冷凍過程
 
  在將細胞放入凍存管之前,需要將其預先冷藏至4℃。然后,將細胞和凍存液混合在一起,并將混合物緩慢地加入凍存管中。隨著混合物的添加,可以使用差壓管來從管中抽出空氣,以防止產生氣泡影響冷凍效果。最后,在-80℃或液氮中快速冷凍樣品。
 
  5、保存條件
 
  一旦細胞成功凍存,它們應當存儲在-80℃或液氮中。若使用液氮,則需確保標簽明確容器的身份,并嚴格控制其溫度以避免液氮瓶內壓力升高,打開時造成安全問題。
 
  總而言之,細胞凍存是一種有效的細胞保存方法,但需要遵循正確的配制、處理和保存條件才能保證成功。只有在正確執(zhí)行了上述步驟后,才能確保細胞在保存期間不受到任何質量損失。

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